食品中菌落總數(shù)反映了食品在生產(chǎn)過(guò)程中的衛(wèi)生情況，體現(xiàn)食品被細(xì)菌污染的程度，是做出科學(xué)衛(wèi)生評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)之一。本文主要對(duì)國(guó)標(biāo)法微生物檢測(cè)中菌落總數(shù)測(cè)定采用的傳統(tǒng)方法即平板計(jì)數(shù)法的注意事項(xiàng)進(jìn)行相關(guān)的分析，并著重介紹了快速檢測(cè)技術(shù)在菌落總數(shù)檢測(cè)中的應(yīng)用。
菌落總數(shù)檢測(cè)快速檢測(cè)新技術(shù)：
13M測(cè)試片快速分析技術(shù)
13M測(cè)試片快速分析技術(shù)概念3M測(cè)試片法是一種便捷可再生水化干膜，適用于細(xì)菌和真菌的計(jì)數(shù)。只需三步就可實(shí)現(xiàn)快速準(zhǔn)確的測(cè)定。
①測(cè)試片中含有一種紅色指示染劑可使菌落著色,計(jì)算所有紅色菌落(不論其大小和顏色深淺均計(jì)算之).②測(cè)試片上沒(méi)有任何菌落生長(zhǎng).③有不多的菌落.④測(cè)試片菌落數(shù)適宜計(jì)數(shù)范圍是25-250⑤測(cè)試片面積約為20cm2,當(dāng)菌落數(shù)超過(guò)250個(gè),如5所示,為了估計(jì)菌落數(shù),可選擇其中一個(gè)或數(shù)個(gè)有代表性菌落的小方格(1cm2),計(jì)算平均菌落數(shù),再乘以20可得到整個(gè)測(cè)試片上的菌落數(shù).⑥測(cè)試片上菌落太多而無(wú)法計(jì)數(shù)⑦有很多高數(shù)量菌落,使整個(gè)生長(zhǎng)區(qū)變粉色，應(yīng)計(jì)錄為菌落太多無(wú)法計(jì)數(shù)。⑧有時(shí)菌落分布出現(xiàn)不均衡,如8所示,這也記錄為菌落太多無(wú)法計(jì)數(shù)。⑨測(cè)試片上的菌落,粗略一看是可計(jì)數(shù)的,然而,你密切注意到生長(zhǎng)區(qū)邊緣,能看到高密度的菌落,應(yīng)記錄為菌落太多無(wú)法計(jì)數(shù)。
測(cè)試片法特點(diǎn)
工作效率的提高根據(jù)大量數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，使用3M測(cè)試片技術(shù)，可以提高實(shí)驗(yàn)室工作效率118%以上。勞動(dòng)資源的使用帶來(lái)生產(chǎn)能力的提高，終的效果就是效益的增加。1.4.2標(biāo)準(zhǔn)化的檢測(cè)方法品質(zhì)穩(wěn)定的快速測(cè)試片克服了傳統(tǒng)的測(cè)試方法存在的由于使用不同批次的培養(yǎng)基，不同的配制條件，不同配制人員而導(dǎo)致的差異性。1.4.3化的認(rèn)證方法3M快速測(cè)試的方法得到包括AOAC，AFNOR在內(nèi)的機(jī)構(gòu)的認(rèn)證，在許多國(guó)家也已獲得*機(jī)構(gòu)的正式批準(zhǔn)，從而可以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性和在世界各地的廣泛認(rèn)可。1.4.4快速得到檢測(cè)結(jié)果對(duì)比傳統(tǒng)的測(cè)試方法，3M快速測(cè)試片縮短檢測(cè)時(shí)間，使您在更短的時(shí)間內(nèi)獲得樣品的測(cè)試結(jié)果，能更加迅速地采取有效的措施解決發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題。1.4.5方便進(jìn)行HACCP認(rèn)證由于檢測(cè)速度快，檢測(cè)項(xiàng)目全，準(zhǔn)確性高。3M為食品生產(chǎn)工藝過(guò)程中關(guān)鍵控制點(diǎn)的監(jiān)控提供了較為完整的系列產(chǎn)品，可以對(duì)包括生產(chǎn)線，生產(chǎn)設(shè)備和環(huán)境在內(nèi)的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行全面的測(cè)試。
ATP法
ATP熒光法檢測(cè)總菌落數(shù)原理
螢火蟲(chóng)會(huì)發(fā)光是由于它能合成將化學(xué)物質(zhì)的化學(xué)能轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽艿纳锎呋瘎?mdash;熒光素酶、蟲(chóng)熒光素(D-luciferin)以及所有細(xì)胞生物都產(chǎn)生的生物能量物質(zhì)—三磷酸腺苷（ATP）。在有氧的條件下，蟲(chóng)光素酶催化蟲(chóng)熒光素和ATP之間發(fā)生氧化反應(yīng)，形成氧化熒光素并發(fā)出熒光。
ATP法特點(diǎn)：
具有成本低，操作簡(jiǎn)單，響應(yīng)速度快等特點(diǎn)2.2.2微生物ＡＴＰ生物發(fā)光法在國(guó)外已被廣泛地運(yùn)用于食品中菌落總數(shù)的測(cè)定。
MTT法
MTT法檢測(cè)原理
檢測(cè)原理為活體微生物線粒體中含有琥珀酸脫氫酶，能使外源性MTT（噻唑藍(lán)）還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜(Formazan)并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。Formazan結(jié)晶形成的量與活菌數(shù)成正比。用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活菌細(xì)胞數(shù)量。
流式細(xì)胞術(shù)
流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)原理檢測(cè)原理：細(xì)胞經(jīng)特異熒光素標(biāo)記后，通過(guò)激光照射，產(chǎn)生特異熒光信號(hào)，通過(guò)對(duì)這些熒光信號(hào)的檢測(cè)和定量計(jì)算出菌群總數(shù)。特點(diǎn)：快速、便捷結(jié)果可靠、便于操作。
結(jié)語(yǔ)
菌落總數(shù)檢測(cè)是微生物檢測(cè)中常見(jiàn)的項(xiàng)目，在檢驗(yàn)的每一個(gè)環(huán)節(jié)都應(yīng)該小心謹(jǐn)慎，準(zhǔn)確操作，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度。國(guó)標(biāo)法采用的平板計(jì)數(shù)法是我們常用的檢測(cè)方法，但是操作過(guò)程較為復(fù)雜，時(shí)間較長(zhǎng)；而其他方法操作簡(jiǎn)便，省時(shí)，但是有的成本相對(duì)較高，并且有的只針對(duì)特定的食品種類。我們應(yīng)該積極關(guān)注新的科學(xué)技術(shù)在檢測(cè)方法中的應(yīng)用，讓檢測(cè)更加準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、便捷和可靠。
